Rannsóknarstofa sameinda ræktunar við Kína landbúnaðarháskólann (CAU) hefur náð frjósömum árangri á sviði erfðabóta á hrísgrjónum, hveiti og annarri ræktun. Við útdrátt kjarnsýrna, sem er lykilatriði í sameindarækt, takmarkar hefðbundin handvirk aðgerð sýnishornið. Mikill fjöldi sýnanna sem unnin eru daglega gerir handvirka pipetting ekki aðeins óhagkvæm, heldur einnig tilhneigingu til þreytu og rekstrarvillna.
PRCXI BIOWorkstation Full Process Empowerment:
Til að brjótast í gegnum þessa flöskuháls og bæta skilvirkni og stöðugleika tilrauna hefur Kína landbúnaðarháskólinn (CAU) keypt PRCXI SC9000 (handbók) og SC9200\/SC9300 (fullkomlega sjálfvirkar) pipetting vinnustöðvar eftir margar rannsóknir og samanburð. Eftir fyrstu notkun og sannprófun gagna í rannsóknarstofubyggingu, með verulegum kostum hverrar rannsóknarstofu til að mæla með hvort öðru, hefur verið uppsöfnuð innleiðing næstum 20 sett af PRCXI pipetting vinnustöðvum.
Yfirlit yfir ferlið fyrir þessa tegund tilrauna:
(Athugið: Vegna trúnaðarins um innihald tilraunar viðskiptavinarins er þetta tilraunaferli dregið saman í samræmi við gerð tilraunanna, ekki raunverulegt ferli viðskiptavinarins og er aðeins til vísan viðskiptavina af sömu gerð)
Undirbúningur búnaðar:
PRCXI Pipetting Workstation, 96- Well Plate, Tips, Magnetic Rack, PCR plötur, lón
Tilraunaaðferð:
① Bætið 100 μl af sýni og 100 μl af lýsisbuffi við hverja holu af 96- brunnplötunni, og blandið vandlega með því að pipa upp og niður 5 sinnum með vinnustöðinni.
② Vortex Segulperlufjöðrunin vandlega fyrir notkun, bætið 200 μl við hvert viðbrögð vel og blandið saman með því að pípast upp og niður 3 sinnum með vinnustöðinni.
③ Ræktaðu í að minnsta kosti 2 mínútur til að leyfa fullkomna bindingu segulperlanna við kjarnsýrur.
④ Settu 96- vel plötuna á segulmagnaðir, láttu standa í 1 mínútu, síðan sogast og fargaðu flotinu meðan á stúkunni stendur.
⑤ Fjarlægðu plötuna frá segulmagnaðirnar, bættu við þvottabuffi við hverja holu, blandið saman með því að pipa upp og niður 5 sinnum og ræktaðu í 2 mínútur.
⑥ Settu plötuna aftur á segulmagnið, láttu standa í 1 mínútu og fargaðu flotinu.
⑦ Fjarlægðu plötuna frá segulmagnaðirnar, bættu þvottabuffi við hverja holu og blandaðu saman með því að pipa upp og niður 5 sinnum.
⑧ Settu plötuna á segulmagnið, láttu standa í 1 mínútu og fargaðu flotinu.
⑨ Bætið þvottabuffi við hver viðbrögð vel, blandið með því að pipa upp og niður 3 sinnum og ræktaðu í 1 mínútu.
⑩ Flyttu plötuna yfir í segulmagnið, leyfðu því að setjast í 1 mínútu og flytja síðan flotið yfir á hreina PCR plötu (flotið inniheldur kjarnsýrurnar).
Þessi vara notar mala einsleitan eða röskun frumna til að brjóta niður plöntufrumuveggi og losa kjarnsýrur (DNA eða RNA). Við lýsingarjafnalausn bindast kjarnsýrur sérstaklega við yfirborð segulperla. Síðari þvottaskref fjarlægja óhreinindi eins og prótein og fjölsykrur. Að lokum eru kjarnsýrurnar skolaðar úr segulperlunum með skolunarjafnalausn. Hreinsuðu kjarnsýrurnar er hægt að nota beint til að nota downstream, þar með talið PCR uppgötvun, raðgreiningu gena og fleira.
Viðbrögð viðskiptavina
Pipetting vinnustöðin frá PRCXI hefur bætt verulega skilvirkni rannsóknarstofunnar eftir að hún var tekin í notkun. Mikil nákvæmni búnaðarins, hvort sem hann er pipetting rúmmál eða hæðareftirlit, hefur í raun forðast tap á sýnum og krossmengun og bætt stöðugleika og áreiðanleika tilrauna niðurstaðna.
Nú á dögum er kjarnsýruvinnsla á rannsóknarstofunni orðið skilvirkari og nákvæmari, sem veitir sterkan stuðning við frekari framfarir rannsókna á erfðafræðilegum framförum.